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Diagnóstico de COVID-19 poderia ser feito em apenas 20 minutos usando duas enzimas CRISPR

Fonte

Universidade da Califórnia em Berkeley

Data

quarta-feira. 18 agosto 2021 07:15

Testes frequentes e rápidos para COVID-19 são essenciais para controlar a propagação de surtos, especialmente à medida que novas variantes mais transmissíveis surgem.

Embora o teste de diagnóstico padrão ouro atual para a COVID-19, que usa qRT-PCR – reação em cadeia da polimerase reversa quantitativa – seja extremamente sensível, detectando até uma cópia de RNA por microlitro, ele requer equipamento especializado, um tempo de execução de várias horas e um laboratório centralizado. Como resultado, o teste normalmente leva pelo menos um a dois dias.

Uma equipe de pesquisa liderada pelos cientistas Dr. David Savage e Dr. Patrick Hsu, dos Laboratórios da Dra. Jennifer Doudna na Universidade da Califórnia em Berkeley, nos Estados Unidos, tem como objetivo desenvolver um teste diagnóstico que seja muito mais rápido e fácil de implantar do que o qRT-PCR. Os pesquisadores combinaram dois tipos diferentes de enzimas CRISPR para criar um ensaio que pode detectar pequenas quantidades de RNA viral em menos de uma hora. A Dra. Jennifer Doudna compartilhou o Prêmio Nobel de Química de 2020 pela invenção da edição do genoma CRISPR-Cas9.

Embora a nova técnica ainda não esteja em um estágio em que rivaliza com a sensibilidade do qRT-PCR, que pode detectar apenas algumas cópias do vírus por microlitro de líquido, ela já é capaz de captar níveis de RNA viral – cerca de 30 cópias por microlitro – suficiente para vigiar a população e limitar a propagação de infecções.

“Você não precisa da sensibilidade do PCR para basicamente capturar e diagnosticar COVID-19 na comunidade, se o teste for conveniente e rápido o suficiente”, disse o Dr. David Savage, professor de Biologia Molecular e Celular. “Nossa esperança era conduzir a bioquímica o mais longe possível ao ponto em que você pudesse imaginar um formato muito conveniente em um ambiente onde você possa fazer o teste todos os dias, digamos, na entrada do trabalho”, destacou o pesquisador.

Os resultados foram publicados na revista científica Nature Chemical Biology.

Vários ensaios baseados em CRISPR foram autorizados para uso de emergência pela agência regulatória americana FDA, mas todos requerem uma etapa inicial em que o RNA viral é amplificado para que o sinal de detecção – que envolve a liberação de uma molécula fluorescente que brilha sob luz azul – seja brilhante o suficiente para ser visto. Embora essa amplificação inicial aumente a sensibilidade do teste para um nível semelhante ao qRT-PCR, também introduz etapas que tornam o teste mais difícil de ser realizado fora de um laboratório padrão.

A equipe liderada pelos cientistas da Universidade da Califórnia em Berkeley procurou alcançar uma sensibilidade e velocidade úteis sem sacrificar a simplicidade do ensaio.

Acesse o artigo científico completo (em inglês).

Acesse a notícia completa na página da Universidade da Califórnia em Berkeley (em inglês).

Fonte: Robert Sanders, Universidade da Califórnia em Berkeley.

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